在日常分離分析工作中,色譜柱的正確使用和維護十分重要,色譜柱使用是否得當,直接影響色譜柱的壽命,稍有不慎就會(huì )降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操縱過(guò)程中,需要留意下列題目,以維護色譜柱。
(1)柱子在裝卸、更換時(shí),動(dòng)作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動(dòng),以免柱床產(chǎn)生空隙。
(2)假如儀器用來(lái)做常規分析,樣品種類(lèi)有限,但分析次數多,則不妨為每一類(lèi)常規分析配置一根柱,這樣有助于延長(cháng)柱子的壽命。
(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動(dòng)。溫度的忽然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì )影響柱內的填充狀況;柱壓的忽然升高或降低也會(huì )沖動(dòng)柱內填料,因此在調節流速時(shí)應該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉動(dòng)不能過(guò)緩。
(4)應逐漸改變溶劑的組成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?br style="padding: 0px; margin: 0px auto;" />(5)如使用柱溫控制裝置時(shí),應留意在通人活動(dòng)相后才能升溫。
(6)一般說(shuō)來(lái)色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除往留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì )迅速降低柱效。
(7)選擇使用適宜的活動(dòng)相,以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一個(gè)預柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預柱為硅膠,可使活動(dòng)相在進(jìn)進(jìn)分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
8)避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內,需要對樣品進(jìn)行預處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個(gè)保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。
(9)經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱,清除保存在柱內的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí),對流路系統中活動(dòng)相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡,每種活動(dòng)相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規分析需要50-75mL。
(10)保存色譜柱時(shí)應將柱內布滿(mǎn)乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。盡對禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過(guò)夜或更長(cháng)時(shí)間。
(11)色譜柱使用過(guò)程中,假如壓力升高,一種可能是燒結濾片被堵塞,這時(shí)應更換濾片或將其取出進(jìn)行清洗;另一種可能是大分子進(jìn)人柱內,使柱頭被污染;假如柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現塌陷,死體積增大。
聯(lián)系我們
杭州天釗科技有限公司 公司地址:杭州市西湖區金蓬街321號2幢C座511室 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)掃一掃 更多精彩
網(wǎng)站二維碼
微信二維碼
微信掃一掃